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【实验方法】你不知道的尼氏染色法

实验原理

尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛分布于各种神经元中,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量都各有差异。

尼氏染色法可以染出尼氏体,用来观察神经元内的细胞结构,还可以通过对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。在此以甲苯胺蓝染料为例,对小鼠脑组织进行尼氏染色。

实验步骤

  1. 新鲜组织固定于10%中性福尔马林溶液48h后,常规脱水包埋;

  2. 切片厚6-8μm,常规脱蜡至水;

  3. 蒸馏水冲洗;

  4. 切片入Toluidine blue Stain,将染色缸置于恒温箱50-60°C侵染25-50min;

  5. 蒸馏水稍冲洗;

  6. 入70%乙醇冲洗;

  7. 95%乙醇迅速分化。分化不易控制,如果分化失败,可重复步骤4;

  8. 无水乙醇迅速脱水;

  9. 二甲苯透明,中性树胶封固;

  10. 显微镜下观察、拍照。

实验结果



小鼠脑组织尼氏染色结果100X 



小鼠脑组织尼氏染色结果400X


 
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