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实验方法:Masson染色


原 理:

马松(Masson)染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一,是胶原纤维(collagen fiber)染色权威而经典的技术方法。主要适用于胶原蛋白和平滑肌的鉴别分析。广泛用于结缔组织、肌肉组织和胶原蛋白的研究等。

该产品染胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色;胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色;胞核蓝紫色。

该产品具有无毒、环保,对人体无伤害、操作简捷,性能稳定,显色清晰,颜色鲜艳,对比清晰分明且染色稳定、所染切片保存时间长且不易褪色等特点,根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显色出来。

1.        石蜡切片脱蜡至水;

2.        铬化处理或去汞盐沉淀,饱和苦味酸酒精溶液去福尔马林色素;

3.        依次自来水和蒸馏水洗;

4.        用苏木素染色液染核5-15min(可以不染细胞核);

5.        充分水洗,显蓝后镜检,至胞核呈蓝色为止,如如过染可盐酸酒精分化;

6.        蒸馏水洗;甩干水分,将玻片水平放置在免疫组化湿盒上,没有此盒的实验室,建议将玻片水平放置在托盘上或者任何你能找到的容器内。在标本上,滴加数滴丽春红酸性复红染色液,染液覆盖住标本即可。水平放置,室温染色染色5-10min;

7.        使用0.2%冰醋酸水溶液,清洗玻片,去除红色浮色,每次1min,3次;

8.        甩干玻片上的水分,滴加磷钼酸水溶液分化处理1-3min;

9.        用滤纸擦掉多余液体,注意滤纸不要接触到样本。不经水洗,直接用苯胺蓝染色液染5-10min;

10.    用冰醋酸水溶液清洗玻片,去除多余染液,使染色色调清晰鲜艳即可;

11.    无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。

结果分析:

胶原纤维、黏液、软骨呈蓝色,胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈粉红色。

注意事项:

1.        无水酒精、二甲苯透明、中性树胶需自备;

2.        铬化处理及脱汞:用0.5%碘酒溶液处理10min,水洗,再用0.5%硫代硫酸钠水溶液脱碘5min,充分水洗;用10%饱和苦味酸酒精溶液再次固定30min,再进行步骤3水洗。

3.        此法操作程序较多,一定要控制好染色步骤,熟练掌握后才能得到较满意的染色结果;

4.        组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间;

5.        0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳,不够可以自己配制;

6.        磷钼酸对丽春红酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可;

7.        为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

大鼠关节200X

 
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